Cultivos
Los medios de cultivo que se incluyen en esta sección son los más utilizados en el diagnóstico rutinario; existen algunos muy especializados, los cuales no se citan en este apartado, la información sobre éstos se ofrece en cada capítulo correspondiente.
Medio saburoaud modificado con glucosa Aislamiento y desarrollo de los hongos, particularmente los asociados a infecciones cutáneas como piel y pelo. la peptona tripteína y la glucosa son los nutrientes. Alto contenido de glucosa, presencia de cloranfenicol, y pH ácido, inhiben el desarrollo bacteriano, favorecen creciemiento de los hongos y levaduras. Para hongos patógenos y saprofíticos. Especialemte levaduriformes. Este agar es el ASD más un antifúngico (cicloheximida =actidiona). Se utiliza para aislamiento primario de la mayoría de los hongos patógenos en los cuales se incluyen los dermatofitos.Son ejemplos de este medio, el medio Mycosel, Dermacel, Mycobiotic. Aspecto: medio sólido, ámbar, transparente pH final a 25 ºC: 7,0 ± 0,2
Saburoaud dextrosa Para hongos patógenos y no patógenos. Bajo pH para crecimiento de hongos, ligeramente inhibe las bacterias. Se puede agregar gentamicina , inhiben gramnegativos o cloranfenicol amplio espectro. El ASD se usa para el aislamiento primario de hongos ambientales y oportunistas y no se recomienda su uso de rutina para aislar los hongos patógenos primarios, porque estos tienen un crecimiento más lento que el de los hongos ambientales.Agar dextrosa de Sabouraud (ADS) y agar extracto de levadura (AEL) Los medios sólidos de ADS y AEL son los óptimos para el aislamiento rutinario de cepas de hongos; se deben incubar a 25-28°C; sin embargo, tienen el inconveniente de que pueden presentar fácilmente contaminación bacteriana debido a que no contienen antibióticos. Ambos medios se consideran más útiles para el aislamiento de hongos de micosis de tipo oportunista.
Agar dextrosa de Sabouraud (ADS) y agar extracto de levadura (AEL) Los medios sólidos de ADS y AEL son los óptimos para el aislamiento rutinario de cepas de hongos; se deben incubar a 25-28°C; sin embargo, tienen el inconveniente de que pueden presentar fácilmente contaminación bacteriana debido a que no contienen antibióticos. Ambos medios se consideran más útiles para el aislamiento de hongos de micosis de tipo oportunista.
Caldo dextrosa de sabouraud Este medio líquido es de utilidad para transportar muestras tomadas con hisopo y, con ello, evitar la desecación y pérdida de viabilidad de los microorganismos que se pretende recuperar; para esto se pueden utilizar tubos de 13 (3) 100 mm con 1 o 2 ml de caldo estéril. Este medio es también útil para reactivar cepas de hongos en medios ligeramente deshidratados, o bien para primocultivo de levaduras.Agar Sabouraud con antibióticos (agar para aislamiento de hongos patógenos) También se trata de un medio rutinario para el aislamiento de diversos hongos; se sugiere sembrarlo a la par en ADS o AEL. En general este medio permite el desarrollo sólo de hongos patógenos primarios, e inhibe el desarrollo de la mayoría de bacterias (por el cloranfenicol) y hongos mohos contaminantes (por la cicloheximida); es importante señalar que cuando se siembran muestras de pacientes con sospecha de candidosis, algunas especies como C. tropicalis son resistentes a la cicloheximida, lo cual puede ser un dato orientador al tipifi car los aislados de estas levaduras. con clorexidina y cloranfenicol, Se utiliza fundamentalmente en el aislamiento de dermatofitos y hongos dimorficos. Inhibe algunas especies de hongos de interés médico (Candida no albicans, Aspergillus, Zygomycetes, Cryptococcus neoformans, etc.
medio de Kamiski modificado
medio de borelli
agar chocolate
AGAR HARINA DE MAIZ O CORN MEAL AGAR El medio se emplea para lograr la esporulación de hongos que difícilmente lo hacen en los medios corrientes, como son los mohos negros. También se utilizan para lograr la reproducción sexuada de algunas especies; debe emplearse con hongos que han sido previamente aislados en un medio de rutina como el sabouraud o el sabouraud modificado. Se emplea para la identificación Acremonium spp, Fusarium spp y dermatofitos.
MEDIO DE ARROZ Se utiliza para lograr la esporulación de los dermatofitos, por que este medio es rico en tiamina. Sin embargo es un medio poco práctico para manipular, porque se contamina fácilmente.
MEDIO DE AGAR ARROZ Como el arroz en grano, se utiliza para lograr la esporulación de los dermatofitos; además se puede emplear en la técnica del microcultivo. Se utiliza para la producción de pseudohifas de levaduras del género Cándida y producción de clamidoconidios de C. albicans. Aspecto: incoloro o amarillo suave, medio sólido, transparente o traslúcido. pH final a 25 °C: 5,6 ± 0,2.
GELATINA LIQUIDA Se utiliza para la identificación de Nocardia spp.; ellas crecen en la superficie del medio de cultivo.
GELATINA AL 12% Se emplea para la identificación de Nocardia, las cuales al crecer licuan la gelatina; también se emplea para la diferenciación entre los mohos negros patógenos y los mohos negros del ambiente.
MEDIO DE LECHE Se utiliza para observar la formación de clamidosporas de Cándida albicans.
AGAR HARINA DE MAIZ (CORN MEAL AGAR) MAS TWIN 80 Se utiliza para observar la formación de clamidosporas y, además, es ideal para apreciar la morfología de las levaduras en general.
MEDIO PARA CLAMIDOSPORAS Este medio se utiliza para lograr la producción de clamidosporas de la Cándida albicans.
AGAR SANGRE Se utiliza para el aislamiento primario o repique de Actinomicetos como Nocardia spp, Actinomyces spp. y Streptomycesspp. También para aislar Cryptococcus spp
AGAR UREA DE CHRISTENSEN Se emplea para diferenciar a Cryptococcus de otras levaduras, pero no permite la diferenciación de las diferentes especies de Cryptococcus. Se utiliza en la identificación de algunos dermatofitos, especialmente Trichophyton rubrum de Trichophyton mentagrophytes y de algunas levaduras (Cryptococcus neoformans
CZAPECK ALMIDON AGAR Se utiliza para la esporulación de mohos negros.
GEL DE AGAR Se utiliza para preparar placas de inmunodifusion que detectan la reacción antígenoanticuerpo en micosis profundas y oportunistas.
MEDIO DE PAPA Y ZANAHORIA Se utiliza para inducir el crecimiento de las formas sexuadas y las formas de resistencia o picnidias de los hongos. Agar papa zanahoria (PCA) Idóneo para estimular la esporulación de hongos miceliares e indicado para la identificación de hongos hifomicetes dematiáceos en general. Aspecto: medio sólido, transparente o translucido
MEDIO DE LA LECHE DESNATADA Se utiliza para la identificación de los Actinomicetos.
MEDIO DE KELLY Se utiliza para revertir los hongos dimórficos de su forma miceliar a levaduriforme.
AGAR ASCOSPORAS Se utiliza para lograr el crecimiento de las formas sexuadas de las levaduras.
MEDIO MODIFICADO DE WICKERHAM Se utiliza para la diferenciación de las especies de Cándida, dada su capacidad de asimilación de diferentes carbohidratos
MEDIO DE TIAMINA PARA DERMATOFITOS Se utiliza para la identificación de los dermatofitos.
AZUCARES AL 1% Permite hacer la diferenciación de las diferentes especies de levaduras, basándose en la fermentación de estos cuatro azucares.
PAPA DEXTROSA AGAR - PDA Se utiliza para la diferenciación de algunos dermatofitos, al hacer evidente su pigmento y la morfología de su colonia.
MEDIO DE KAMISKI MODIFICADO Se utiliza para el aislamiento primario y la esporulación de los hongos patógenos que son los agentes de la dermatomicosis y las micosis intermedias.
MEDIO DE BORELLI Se utiliza para el aislamiento primario y la esporulación de hongos ambientales. Se utiliza para favorecer la conidiación y producción de pigmento de los dermatofitos, particularmente de Microsporum canis
MEDIO CON VITAMINAS Se utiliza para lograr el aislamiento de dermatofitos exigentes como Trichophyton verrucosum.
XANTINA HIPOXANTINA AGAR Se utiliza para la identificación de los actinomicetos.
MEDIO DE JELLI Se utiliza para el montaje de placas de cultivo. Para utilizarlo se calienta al baño de maría a 55 C, se agrega una gota de la suspensión a la preparación y se cubre con cubre objeto.
CHROMagarCandida. Se utiliza para el aislamiento e identificación de algunas especies del género Candida.
Agar Lowenstein-Jensen Este medio se utiliza sobre todo para obtener primoaislamientos de actinomicetos como Actinomadura madurae y Streptomyces somaliensis, los cuales, por su exigencia nutritiva (similar a la de Mycobacterium tuberculosis), no se desarrollan fácilmente en medios micológicos rutinarios.
Agar alpiste negro La presencia de la enzima fenol-oxidasa presente en el metabolismo de levaduras de la especie Cryptococcus, permite diferenciarlas de otras al metabolizar los derivados del extracto de alpiste negro (Guizotia abissinica) y crecer con un pigmento de color marrón oscuro por la presencia de derivados de ácido cafeínico; de esta manera, es posible diferenciar Blastomyces dermatitidis de Cryptococcus neoformans. Un medio con similar utilidad es el medio de DOPA o dihidroxi fenilalanina (agar Staib), cuyo fundamento es el mismo que para el agar alpiste negro; sin embargo, resulta mucho más económico este último.
Medios enriquecidos: agar Borelli, agar harina de amaranto, agar tierra de jardín, agar de Czapek-Dox En algunas ocasiones los hongos sufren de pleomorfi smo fúngico, fenómeno mediante el cual se pierden muchas características coloniales y microscópicas, sobre todo de las cepas de hongos mohos; el uso de medios enriquecidos permite revertir el fenómeno y estimular la producción de formas microscópicas, pigmentos y colores de superfi cie. Es recomendable el agar Borelli, principalmente para dermatofi tos; el agar harina de amaranto para especies de Sporothrix; el agar tierra de jardín se recomienda para cepas de hongos patógenos primarios como Histoplasma capsulatum, Coccidioides immitis, C. posadasii y Paracoccidioides brasiliensis, mientras que el agar de Czapek Dox mejora el desarrollo de cepas de Aspergillus.
Agar corn meal + tween 80 al 1% Una herramienta muy útil para identifi car especies de Candida como C. albicans y C. dubliniensis, distinguiéndolas de otras, es la formación in vitro de clamidoconidios; este método tiene alta sensibilidad y especifi cidad, y su lectura e interpretación es bastante sencilla.
Medios diferenciales: medios cromogénicos (CHROMagar-Candida®, Candiselect 4®), agar leche descremada Los medios con interpretación bioquímica (cambios de coloración en las colonias o hidrólisis de metabolitos) son utilizados para orientar en la identifi cación de especies, principalmente de levaduras y actinomicetos; los medios cromogénicos comerciales, como CHROMagar-Candida®, Candiselect 4® o medios preparados en el laboratorio, como el de Pagano Levine (TTC), ayudan a diferenciar especies de Candida, mientras que la observación de hidrólisis de caseína, xantina e hipoxantina establece un patrón bioquímico útil para las especies de Nocardia.
AGAR DEXTROSA-LECHE-PURPURA DE BROMOCRESOL
Agar extracto de malta (MEA) Medio para el aislamiento y recuento de levaduras y hongos miceliares. Adecuado para la identificación de Zigomicetes, y especies de Acremonium spp, Aspergillus spp, Cladosporium spp, Penicillum spp, Paecilomyces spp, Scopulariopsis spp, etc.
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